Sementes de pimenta (Capsicum baccatum) 'Dedo de Moça' destinadas ao plantio comercial e adquiridas no município de São Paulo, SP, analisadas quanto à presença de vírus, por meio de testes biológicos e sorológicos revelaram-se infetadas por uma estirpe do Pepper mild mottle virus (PMMoV). Para confirmar a identidade do isolado, promoveu-se a RT-PCR com oligonucleotídeos que flanqueiam a ORF da capa protéica de espécies do gênero Tobamovirus do subgrupo 1. Os fragmentos de DNA amplificados, quando seqüenciados e comparados com outros isolados de tobamovírus depositados no GenBank, apresentaram valores de identidade de nucleotídeos entre 94 e 100% com outras seqüências de PMMoV, inferiores a 75% para as demais espécies de tobamovírus do subgrupo I (Tobacco mosaic virus, Tomato mosaic virus e Odontoglossum ringspot virus) e 65% para os tobamovírus dos subgrupos II e III. O PMMoV-BR revelou 100% de identidade com isolados japoneses, sugerindo que este patógeno pode ter sido introduzido daquele país. A seqüência de aminoácidos deduzidos da capa protéica indicou também, que este isolado não é capaz de quebrar a resistência do gene L3 de Capsicum spp. Fato confirmado pelos sintomas causados nas hospedeiras diferenciais de Capsicum spp., verificando-se que este isolado não foi capaz de infetar plantas de C. chinense (L3) e C. chacoense (L4). Estes resultados confirmaram a importância da caracterização dos isolados de tobamovírus, fundamental para adequação de medidas de controle, principalmente, prevenindo a entrada e posterior disseminação do patógeno em novas áreas de cultivo.

A strain of Pepper mild mottle virus (PMMoV) was identified by biological and serological analysis of pepper (Capsicum baccatum) 'Dedo de Moça' seeds from São Paulo, SP, Brazil. To confirm these results, RT-PCR was performed with specific primers flanking the coat protein (CP) ORF of tobamoviruses in subgroup 1. The DNA-amplified fragments, when sequenced and compared with other tobamovirus CP sequences stored in the GenBank, showed nucleotide similarity between 94 to 100% with other PMMoV CP sequences, and below 75% with the subgroup I tobamovirus species (Tobacco mosaic virus, Tomato mosaic virus and Odontoglossum ringspot virus) and 65% with species in the subgroups II and III. The Brazilian isolate showed 100% identity with a Japanese isolate, strongly suggesting that this pathogen could have been introduced from that country. This fact confirms the importance of the isolate's characterization, in order to establish adequate control measures to guarantee healthy seed interchange and to avoid the introduction and spread of tobamoviruses into new growing areas. The deduced CP aminoacids sequence showed that the PMMoV-BR was not capable to overcome L3 gene resistance. This fact was confirmed by the inoculation and reaction of differential Capsicum species. The Brazilian isolate was not able to infect C. chinense (L3) and C. chacoense (L4).

Plantas de alface (Lactuca sativa) cv. Verônica cultivadas em sistema hidropônico, provenientes dos municípios de Campinas e Sumaré, SP, apresentando sintomas típicos aos induzidos pelos tospovírus, foram coletadas para análise. Partículas pleomórficas arredondadas e envelopadas (80-100 nm de diâmetro) foram visualizadas ao microscópio eletrônico de transmissão. Plantas indicadoras, incluindo a alface, apresentaram sintomas típicos daqueles induzidos pelos tospovírus. Algumas diferenças foram observadas em Gomphrena globosa, que reagiu com sintomas locais e sistêmicos. Nestas amostras, identificaram-se dois isolados do Tomato chlorotic spot virus (TCSV) através de DAS-ELISA e seqüenciamento de produtos de DNA do gene da capa protéica amplificados via RT-PCR. O alinhamento das seqüências indicou elevados níveis de homologia com outros isolados de TCSV do GenBank. Este é o primeiro relato de perdas causadas por tospovírus em cultivos comerciais de alface hidropônico, no Brasil. Os aspectos epidemiológicos envolvidos na dispersão do vírus, nestas condições, ainda precisam ser esclarecidos, uma vez que a disseminação de tospovírus através de solução nutritiva tem sido relatada para o Tomato spotted wilt virus (TSWV).

In the regions of Campinas and Sumaré, São Paulo, Brazil, hidroponically grown crops of Lettuce (Lactuca sativa) cv. Verônica, which showed virus-like symptoms were examined by electron microscope, biological, serological and molecular tests. Pleomorphic, enveloped particles (80-100 nm in diameter) were always detected in these samples. Experimentally inoculated host plants, including lettuce, reacted with tospoviruses-induced symptoms. Some differences were observed in Gomphrena globosa, which reacted by showing local lesions and systemic mosaic. Two isolates of Tomato chlorotic spot virus (TCSV) were identified by DAS-ELISA and by RT-PCR. The sequencing and alignment of the RT-PCR coat protein amplified fragments have indicated a high degree of homology with the TCSV sequences stored in the GenBank. This is the first report of losses due to a virus from the genus Tospovirus in commercial hydroponic lettuce crops in Brazil. Further epidemiological studies are needed for better understanding the spread of the virus in hydroponic crops, since Tomato spotted wilt virus (TSWV) is reported to spread through the nutritive solution.

O gênero Erigeron (Asteraceae), de plantas da vegetação espontânea, encontra-se amplamente disseminado nas regiões Sul e Sudeste do Brasil, sendo freqüentemente encontrado em lavouras perenes e anuais. Plantas de E. bonariensis com sintoma de mosaico, típico do induzido por vírus, foram coletadas no município de São Paulo e submetidas a análises ao microscópio eletrônico de transmissão, testes biológicos, sorológicos e moleculares. Em cortes ultrafinos do tecido foliar original, observaram-se inclusões tubulares e cata-ventos dispersos no citoplasma. Através de inoculação mecânica, somente Chenopodium amaranticolor, C. quinoa, Nicotiana benthamiana e N. clevelandii foram infetadas. Os resultados obtidos em ELISA foram negativos quando se utilizaram antissoros contra o Turnip mosaic vírus (TuMV) e diferentes estirpes do Potato virus Y (PVY), constatando-se relacionamento sorológico com o Lettuce mosaic virus (LMV). Com a utilização de oligonucleotídeos específicos para LMV amplificaram-se fragmentos esperados de aproximadamente 280 pb, que seqüênciados confirmaram a identidade do vírus. A ocorrência do LMV em E. bonariensis, gênero da mesma família botânica da alface (Lactuca sativa), é de grande importância, pois talvez possa atuar como reservatório para infecção de campos de produção de alface. Este é o primeiro relato, no Brasil, de vírus infetando Erigeron sp., o qual só havia sido reportado como hospedeira natural do Bidens mottle virus (BiMoV) e do Tomato spotted wilt virus (TSWV) nos Estados Unidos.

The genus Erigeron, Asteraceae family, comprises weed plants spread over Southern and Southeastern Brazil, and, frequently, is found among annual and perennial crop plants. Erigeron bonariensis L.plants showing symptoms of mosaic, similar to those caused by plant viruses, were collected in São Paulo State and submitted to electron microscopy, biological, serological and molecular analysis. Ultrathin sections of the original foliar tissues samples showed tubular and pinwheel inclusions dispersed in the cytoplasm of infected cells. Following transmission by mechanical inoculation, only Chenopodium amaranticolor, C. quinoa, Nicotiana benthamiana and N. clevelandii were infected. The ELISA results were negative with antisera against Turnip mosaic virus (TuMV) and Potato virus Y (PVY) and positive for Lettuce mosaic virus (LMV) antiserum. With specific primers to LMV, 280 bp fragments were amplified and sequenced, confirming the virus identity as LMV. The occurrence of LMV in E. bonariensis, which belongs to the lettuce (Lactuca sativa) family, is significant since it may also act as LMV reservoir for lettuce field crops. This is the first report in Brazil of a virus infecting Erigeron sp. which has also been reported as a natural host of Bidens mottle virus and Tomato spotted wilt virus in the United States.

Os tospovírus são responsáveis por perdas significativas em diversas culturas, principalmente solanáceas. No município de São José dos Campos (SP), plantas de jiló (Solanum gilo) apresentando sintomas de mosaico, bolhosidades, nanismo e queda acentuada da produção foram coletadas para análise. Visando a caracterização do agente causador dos sintomas, testes biológicos, elétrono microscópicos, sorológicos e moleculares foram realizados. Através de inoculação mecânica em plantas indicadoras das famílias Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae obtiveram-se resultados típicos aos esperados para tospovírus. Ao microscópio eletrônico de transmissão, observaram-se, em contrastação negativa, partículas pleomórficas com diâmetro entre 80 e 110 nm e em cortes ultra-finos partículas presentes em vesículas do retículo endoplasmático. Através de DAS-ELISA, identificou-se o Tomato chlorotic spot virus (TCSV). A partir de RNA total extraído de folhas infetadas, amplificaram-se, via RT-PCR, fragmentos correspondentes ao gene da proteína do capsídeo (cp) os quais foram seqüenciados e comparados com outros depositados no "GenBank". A homologia de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos foi respectivamente de 99 e 95% quando comparada com seqüências de isolados de TCSV. A comparação com as outras espécies do gênero Tospovirus apresentou valores de homologia entre 72 e 84%. Estes resultados confirmam a identidade deste vírus como pertencente à espécie TCSV, que é predominante no Estado de São Paulo e importante patógeno de outras plantas cultivadas. Além disso, variedades de jiló quando inoculadas foram susceptíveis tanto ao TCSV como às espécies Tomato spotted wilt virus (TSWV) e Groundnut ringspot virus (GRSV).

Tospoviruses are responsible for important losses in most crops, mainly Solanaceae. Gilo (Solanum gilo) plants showing mosaic, blistering, stunting and 100% production losses were collected for analysis from São José dos Campos in the State of São Paulo. Biological, electron microscopy, serological and molecular tests were carried out in order to characterize the virus isolate. The mechanical inoculation on Amaranthaceae, Solanaceae and Chenopodiaceae plants showed typical tospovirus-induced symptoms. Pleomorphic particles from 80 to 110 nm were observed in negatively stained preparations and in vesicles of the endoplasmic reticulum of infected cells. Tomato chlorotic spot virus (TCSV) was identified by DAS-ELISA. DNA fragments were amplified by RT-PCR, with specific primers designed to the nucleocapsid gene (N) of the main Tospovirus species, sequenced and compared with others in the GenBank. The nucleotide and amino acid deduced sequences homology was 99 and 95%, respectively, with TCSV. Comparison with other Tospovirus species presented values between 74 and 81%. These results confirmed the identity of this virus isolate as TCSV, the main tospovirus species in São Paulo that also damages other Solanaceous crops. Varieties of gilo have been inoculated showing susceptibility to TCSV, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Groundnut ringspot virus (GRSV).